LAMP (Ligase-based-loop-mediated-isothermal amplification) er en molekylærbiologisk test der påviser et 214 bp sekvens i Plasmodium sp. mitochondria ikke kodende region.
LAMP testen påviser tilstedeværelse af malaria (Plasmodium sp)., men er ikke species specifik eller kvantitativ. Ved positiv LAMP er der derfor behov for efterfølgende mikroskopi til bestemmelse af malaria species og parasitæmigrad.
Ved 1 negativ LAMP test er der ikke behov for yderligere undersøgelser.
First response Immunkromatografisk undersøgelse (Ag-test) udføres samtidig og påviser en pan-malaria specifik LDH ag og pHRP-2 specifik for Plasmodium falciparum.
Hvis enten LAMP eller Ag-test er positiv vil KMA efterfølgende mikroskopere medsendte udstryg (Nordsjælland) eller rekvirere udstryg til mikroskopi (Herlev og Gentofte).
Patienter mistænkt for malaria skal henvises til prøvetagning på hospital.
For patienter med påvist malaria, hvor der ønskes kontrol af behandling/ parasitæmigrad, bestilles mikroskopi af 2 dråbe- og 2 udstrygningspræparater.
Kan kun bestilles på hospital.
Rejseanamnese og evt. malariaprofylakse skal altid angives.
Objektglas, facetslebne afr. hjørner
7. Holdbarhed og opbevaringsforhold
Holdbarhed
Der er ikke foretaget studier af længerevarende holdbarhed, da prøven skal sendes akut eller semiakut.
Opbevaring
Stuetemperatur.
8. Forsendelse
Fra Herlev Hospital sendes prøver (EDTA-glas eller udstryg) i gul forsendelsespose med akut piccoline.
Denne prøve må ikke sendes med rørpost.
Fra Gentofte og Nordsjællands Hospital sendes prøver (EDTA-glas og/eller udstryg) akut med taxa til KMA Herlev.
Prøver fra Gentofte og Nordsjællands Hospital pakkes i en gul forsendelsespose, den gule pose lægges i en kuvert, på kuverten skrives malaria og prøven afleveres på adressen Borgmester Ib Juuls vej 52, 5.etage i KMAs prøvemodtagelse (elevatoren kan tages op til 5. sal).
Ved akut undersøgelse mellem kl. 8 og 22 skal dette ske efter forudgående aftale med vagthavende læge på KMA (386)82452. (Oplys desuden altid rejseanamnese og evt malariaprofylakse).
Alle akutte prøver til KMA, Herlev,
som er meldt skal være klar til afsendelse til før kl. 22.
Mellem 22 og 8: mikrobiologisk vagthavende RH: 31666332.
Prøver, der ikke er meldt som akutte prøver, og som ankommer efter kl. 20.30, vil først blive analyseret dagen efter.
Emballering: Både dråbe- og udstrygningspræparaterne tørres støvfrit i vandret stilling, før de anbringes i forsendelsesetuiet.
9. Svarafgivelse
Ved akutte prøver samt positive fund kontakter KMA vagthavende læge klinisk vagthavende læge, når der er svar på både Ag-test og LAMP uanset resultat eller før hvis AG-testen bliver positiv.
Når der er lavet mikroskopi og der foreligger species identifikation og parasitæmigrad, kontaktes vagthavende læge på de kliniske afdelinger igen.
Negativt svar og foreløbigt positivt svar kan forventes inden for 1 time. Endeligt positivt svar 1-2 timer senere, fra modtagelse af udstrygning bestilt ved klinisk biokemisk afdeling.
10. Tolkning
Analysen er så sensitiv at der kun skal undersøges for malaria en gang, hvis LAMP-test er negativ.
Positiv LAMP test og negativ mikroskopi kan ses efter færdigbehandlet malaria, meget lav parasitæmigrad eller falsk positiv LAMP test.
LAMP testen har en høj specificitet, og falsk positive prøver er sjældent, men ses. Ca. 3 % var falsk positive i et studie fra RH. Ved positiv LAMP, men negativ mikroskopi anbefales det at gentage mikroskopien på nyt udstryg dagen efter. Bestil Behandlingskontrol NPU21598.
For patienter med Plasmodium falciparun bestilles behandlingskontrol i dagtiden til opfølgning af parasitæmigrad. Se nedenfor.
LAMP test og Ag test kan være positiv i en måned eller længere efter relevant behandling for malaria og kan ikke bruges som behandlingskontrol.
Under behandlingen af falciparum malaria skal parasitæmigraden følges dagligt, til negative udstryg foreligger, og igen 7 dage efter behandlingsstart. Klinisk bedring og fald i parasitæmien indtræder sædvanligvis i løbet af 1.-3. behandlingsdøgn.
Manglende fald i parasitæmigraden inden for de første døgn eller forekomst af trofozoitter på 7. dagen efter behandlingsstart er ensbetydende med behandlingsresistens, også selv om patienten er velbefindende. Derimod er forekomst af gametocytter på 7. dagen ikke udtryk for resistens.
Parasitæmigraden skal ikke følges ved benign malaria, og disse patienter kan udskrives, så snart den kliniske tilstand tillader det. Ved infektion med P. vivax eller P. ovale følges behandlingen op med primakin til behandling af leverfasen i alt 14 dage.
Fund af andre blodparasitter kan ikke diagnosticeres med LAMP, men kun ved mikroskopi af dråbe- eller udstrygningspræparaterne (filaria, trypanosomer, babesia, leishmania), og/ eller specifk PCR.
11. Akkrediteret (ISO 15189:2022;DANAK, Reg.nr. 1055)
Nej.
12. Bemærkninger
13. Referencer
Versionsdato